teknova培養基pH值對細胞的影響作用
發(fā)布日期:2023-02-07 點(diǎn)擊:989
teknova培養基是用來(lái)供給細胞營(yíng)養,促使細胞增殖的,也是細胞賴(lài)以生長(cháng)的環(huán)境。細胞培養實(shí)驗中用量比較多的就是細胞培養基,雖然細胞培養試驗基本技術(shù)大同小異,但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件,則會(huì )導致細胞表達不同的表型。
常見(jiàn)的培養基添加因子
1、青霉素-鏈霉素(雙抗生素):用于預防細胞污染
2、胰島素:作為細胞培養的添加劑,可促進(jìn)細胞增殖、延長(cháng)細胞壽命,增加蛋白和核酸的表達量。
3、胰島素-轉鐵蛋白-硒添加劑(ITS):可降低多種細胞常規維持和低密度貼壁培養時(shí)所需的胎牛血清濃度。
4、地塞米松:一種抗炎糖皮質(zhì)素,對細胞存活、細胞信號傳導和基因表達具有一系列的影響。用于研究細胞凋亡、細胞信號傳導通路和基因表達。
5、氫化可的松:促進(jìn)表皮上皮細胞和乳腺上皮細胞增殖生長(cháng),提高神經(jīng)膠質(zhì)細胞和成纖維細胞的克隆形成率。
6、白細胞介素2(IL-2):IL-2作為T(mén)細胞生長(cháng)因子,可增強NK細胞的細胞溶解活性,并促進(jìn)B細胞產(chǎn)生免疫球蛋白。常用于NK92細胞的培養。
常見(jiàn)的問(wèn)題
1、培養基使用效果不佳:應定期確認teknova培養基有效期,并確認是否使用細胞相應的培養基,培養基使用不當會(huì )影響細胞狀態(tài)。例如,293T需用高糖DMEM培養,而THP-1則需要用RPMI1640培養!
2、培養基使用時(shí)應儲存于4ºC并分裝,避免反復升溫加速谷氨酰胺的降解。
3、不同培養基由于成分不同,顏色也不盡相同,例如DMEM呈鮮紅色,而MEM呈粉紅色。
4、細胞培養過(guò)程中,可根據細胞培養基顏色變化,對培養狀態(tài)進(jìn)行分析,當teknova培養基變橙色甚至黃色時(shí),說(shuō)明細胞代謝產(chǎn)生了大量酸性物質(zhì),需及時(shí)更換新鮮的完全培養基。
5、培養基開(kāi)封,或者培養皿/瓶從培養箱中取出時(shí),由于和空氣發(fā)生氣體交換,顏色會(huì )變?yōu)樽霞t色,放到CO?培養箱中即可恢復pH值,顏色變?yōu)檎5孽r紅色。